特級胎牛血清作為細胞培養(yǎng)基中的主要天然成份,是生物實驗室*的耗材之一。近年來,隨著我國生命科學產業(yè)的不斷發(fā)展,國內的用量也與日俱增。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
在選擇特級胎牛血清時應格外留意篩選內毒素:
1、養(yǎng)免疫細胞時,過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。
2、養(yǎng)干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。
3、基因敲除相關的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內毒素(≤1EU/ml),對實驗至關重要;
4、實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。
5、原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內毒素,是保證實驗順利的第1步。
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