omega試劑盒的使用非常便捷這是眾所*的,但同時(shí)也有一些特殊因素時(shí)刻影響試驗(yàn)的正常結(jié)果。較為常出現(xiàn)的問題是顯色淡,靈敏度偏低、重復(fù)性不佳、假陽性結(jié)果和假陰性結(jié)果,不管出現(xiàn)什么樣的結(jié)果,不但浪費(fèi)客戶的金錢、樣本、精力,更重要的是對臨床做出了危險(xiǎn)判斷。
一、顯色淡,靈敏度偏低
1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長,溫度太高;所以盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。
2、培養(yǎng)箱溫度不足37℃,應(yīng)注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。
3、保溫時(shí)間不足;所以做實(shí)驗(yàn)時(shí)一定注意時(shí)間的重要性,如果怕忘了時(shí)間,可以校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。
4、移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔;所以保證校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用。
、蒸餾水水質(zhì)有問題,要使用新鮮合格的蒸餾水。
二、假陽性結(jié)果和假陰性結(jié)果
1、標(biāo)本的采集與保存
1)當(dāng)標(biāo)本采集保存不當(dāng)產(chǎn)生溶血時(shí),紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì),其通過吸附或“PP效應(yīng)”(蛋白質(zhì)間相互吸附的現(xiàn)象)結(jié)合后,可催化A、B液顯色而造成假陽性
2)標(biāo)本采集保存不當(dāng)致細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng);標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG聚合,易使間接法的試驗(yàn)本底加深。因此,標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。
2、加樣
1)如果樣品稀釋液少加或血清多加,都會(huì)引起本底增高。對于間接法來說,受上述兩個(gè)因素影響更大。因?yàn)檠逯惺軝z的特異性IgG只占IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強(qiáng),非特異性IgG可直接吸附到固相載體上,有時(shí)也可吸附到包被抗原的表面。這些非特異性的IgG均可以和酶標(biāo)二抗發(fā)生反應(yīng)而造成較高陰性本底或假陽性。如果加入的血清過多,高于規(guī)定的稀釋倍數(shù),極易造成高值陰性。反之,造成假陰性。
2)如果血液未開始凝固或凝固不*時(shí)就強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果。